本发明公开一种对抗体pH依赖结合活性的改造及筛选的方法，包括步骤：(1)构建野生型抗体scFv质粒模板；(2)对抗体的6个CDR区进行定点突变，用组氨酸替代CDR区域的每个氨基酸；(3)建立Capture‑ELISA条件并进行高通量筛选；(4)KD‑ELISA和FACS检测：对样品进行梯度稀释后，用不同pH buffer进行KD‑ELISA的检测，根据检测数据绘制的曲线，确认目标克隆在抗原表面和细胞表面靶点的pH依赖结合活性。本发明提供的方法能够高通量、高效率、低成本的获得pH依赖结合活性的抗体。