本申请提供了一种多特异性抗体及其制备方法和用途。所述多特异性抗体包含：a)能特异性结合第一抗原的Fab片段，其中所述Fab片段由一条轻链以及一条重链的CH1和可变区组成；b)第一肽接头，所述第一肽接头的N端与所述重链融合；c)第二肽接头，所述第二肽接头的N端与所述轻链融合，其中所述第一肽接头和所述第二肽接头之间仅能形成一个二硫键，并且各自独立地选自以下：包含Seq ID NO.1‑2所示序列中的任一种的肽接头，其中X代表除Cys的任意氨基酸，或者缺失。所述抗体可以容易地通过重组表达产生并且能够同时靶向结合两个不同抗原或同一抗原的不同表位，或更多不同抗原的多个表位。