本发明公开了一种利用酵母菌制备酸性纤维素酶的方法。其特征是在培养基中加入酵母菌种进行培养，然后经离心分离得到的上清液即为酶液，将酶液经沉淀分离可得粗酶，粗酶分离纯化，即得产品纤维素酶。本发明所提供的酸性纤维素酶的制备方法工艺简单，成本低，所得纤维素酶对细菌纤维素，其活性高，降解效果好。