本发明涉及一种从微生物法制备雄烯二酮的固体下脚料中回收、精制雄烯二酮的方法，该方法通过不同种类的溶剂反复多次将下脚料中的固体不溶物溶解分离，最后合并滤液并浓缩，再分离提纯得到了纯度高、收率好的雄烯二酮。本发明不仅实现了废弃下脚料资源的有效分离、回收再利用，而且降低了环境污染风险，提高了企业的经济效益。