本发明公开了一种pH敏感型透明质酸‑多柔比星纳米前药的制备方法及其应用，该纳米前药的制备过程如下：首先使4‑氨甲基苯甲酸甲酯中的氨基与透明质酸的羧基反应形成酰胺键，接着使上一步反应物中的甲氧基与水合肼形成联氨，产物进一步与多柔比星的羰基形成腙键，最后通过超声辅助自组装法制得纳米前药颗粒。对该纳米颗粒进行了微观结构和体外释放性能研究，进一步可通过细胞摄取和细胞毒性实验，证实该高分子前药纳米颗粒具有明显的pH敏感性以及理想的体外抗肿瘤活性，且能避免小分子药物多柔比星存在的毒副作用大等问题，可为临床应用提供依据。