本发明公开了猪瘟核酸病毒样颗粒的制备方法及其应用，属于应用分子生物学领域。本发明以pTrcHis‑MS2为基础载体，通过改造、修饰MS2噬菌体外壳蛋白编码序列，构建了新型的Armored RNA表达载体pTMACC。进一步通过基因克隆将猪瘟核酸检测靶基因连接至pTMACC，然后进行表达、纯化，制备猪瘟核酸假病毒颗粒。利用本发明制备的猪瘟核酸假病毒颗粒，适用于猪瘟核酸国家标准及OIE推荐检测方法，可以在制备用于监控猪瘟疫情的高效阳性参比物质中进行推广应用。