本发明公开了一种提高核桃饼粕蛋白的抗氧化活性方法，包括以下步骤：S1：测试酶种类对核桃饼粕蛋白得率的影响；S2：测试酶添加量对核桃饼粕蛋白得率的影响；S3：测试料液比对核桃饼粕蛋白得率的影响；S4：测试粒径对核桃饼粕蛋白得率的影响；S5：测试提取时间对核桃饼粕蛋白得率的影响；S6：测定提取液的蛋白含量；S7：酶辅助提取核桃饼粕蛋白响应面实验；S8：酶种类对核桃饼粕蛋白得率的影响；解决了现有方法无法应用于食品和药品领域、实验过程中有温度控制该单因素成本较高，安全系数较低以及所获得的饼粕蛋白抗氧化活性极低、缓冲液无法获得较高的蛋白得率的问题。