本发明公开了一种基于对Rbmy基因进行编辑来实现动物性别控制的方法和应用，该方法是通过利用CRISPR/Cas9系统特异性地切割Y染色体上的Rbmy基因来实现动物性别控制的。Rbmy基因编码一种生殖细胞特异的核蛋白，这种蛋白是与精子发生相关的一种重要因子，对Rbmy基因进行切割，可以使Rbmy基因丧失活性，进而使得Y精子或带有Y精子的受精卵丧失活性而无法发育为正常的胚胎，最终来提高雌性动物的出生比例，达到性别控制的目的。由此，可以通过该方法对动物后代出生的性别比例进行控制，以达到使具有更好的经济价值的雌性动物出生比例提高，从而大大提高生产效率和经济效应。