本发明提供一种人血浆PTEN基因甲基化检测试剂盒及检测方法；所述试剂盒包括：针对人PTEN基因启动子区中CpG富集位点设计的甲基化特异引物对，以及针对人PTEN基因启动子区‑978至‑786位置设计的非甲基化特异引物对。所述甲基化特异引物对的序列如SEQ ID No.1和SEQ ID No.2所示；所述非甲基化特异引物对的序列如SEQ ID No.3和SEQ ID No.4所示。本发明解决了手术标本的获取创伤性大，甲基化的检出率也相对较低等缺陷；检测针对PTEN基因启动子区中CpG位点，特异性强、获取容易、创伤性小。