本发明公开了一种抗牛支原体MbovP579蛋白的单克隆抗体，它是由杂交瘤细胞株1A2分泌的，所述杂交瘤细胞株1A2保藏在中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO：C2018219。该单克隆抗体能与牛支原体发生反应，不与无乳支原体、鸡毒支原体、精氨酸支原体、绵羊肺炎支原体等反应，具有很高的特异性，可用于鉴别牛支原体与无乳支原体。而且能与更多的牛支原体包括临床分离株和标准参考株反应，在牛支原体的检测方面具有一定的广谱性。