本发明公开了抗人Legumain蛋白的单克隆抗体、杂交瘤细胞株LGMN‑2及其用途。本发明所提供的杂交瘤细胞株，名称为LGMN‑2，保藏号为CGMCC NO.12995。本发明所提供的抗人Legumain蛋白的单克隆抗体，由名称为LGMN‑2，保藏号为CGMCC NO.12995的杂交瘤细胞株分泌产生。本发明的单克隆抗体具有较高的效价，间接法效价最高达1 : 2.56×108。本发明的单克隆抗体与Legumain同家族蛋白Cathepsin B，Cathepsin H和Cathepsin L无交叉反应，具有较好的特异性。