本发明涉及一种提升维生素C前体2‑酮基‑L‑古龙酸效率的方法，该方法是在以L‑山梨糖为底物，大小菌混菌发酵生产2‑酮基‑L‑古龙酸的发酵体系中，其所用的种子培养基和发酵培养基中含有酵母蛋白胨或/和核黄素。本发明通过改良培养基组成，可有效提升小菌的生长和产酸能力、提高发酵转化率，缩短发酵周期，并降低发酵结束时的物质残留，改善发酵液质量。