本发明涉及一种动物胆酸类成分的薄层显色剂及薄层鉴别方法，所述薄层显色剂为含有对甲氧基苯甲醛和硫酸的乙醇溶液；所述薄层鉴别方法，包括以下步骤：(1)将处理后的样品溶液点于同一薄层板上；(2)将挥干样品溶剂后的薄层板，置于预饱和15‑25min展开缸中；(3)挥干展开剂，喷以所述显色剂显色，加热；(4)在365nm紫外灯下检视。本发明的薄层显色剂，与一般的蓝色荧光斑点显色剂对比，专属性更好，更具区分度，特别是在中成药胆酸类成分的薄层鉴别时，不受其他结构相似的胆酸类成分的干扰，亦可避免邻近位置其他成分荧光斑点的颜色遮盖情况。本发明的动物胆酸类成分的薄层鉴别方法，具有操作简单、成本低、适用范围广等优点。