一种利用发酵液分割法提高发酵罐使用效率的糖化酶发酵工艺，属于酶工程和发酵工程技术领域。本发明是在黑曲霉GB0506糖化酶发酵酶活线性增长末期，将发酵液分配到几个未使用的发酵罐中，加新鲜发酵培养基继续发酵，确定发酵液分割的最佳时机为发酵118‑120小时，最佳分割方式为1罐分割为3罐。与原有工艺相比，采用该法获得的发酵液最终发酵酶活没有明显变化，但平均每一发酵罐在罐发酵时间大幅下降，极大节约发酵过程电能消耗。本发明还提供一种针对将发酵液平均分配到3个发酵罐的发酵罐组合使用方法，在相应工艺条件下，单位发酵体积的发酵强度提高54%以上。利用发酵液分割法的糖化酶发酵新工艺为酶制剂生产企业在原有设备基础上大幅提高发酵罐使用效率。