本发明公开了一种发酵法制备11α, 17α‑羟基黄体酮的方法，以17α‑羟基黄体酮为底物，通过在培养基中添加磁性纳米四氧化三铁粉，利用赭曲霉发酵法制备11α, 17α‑羟基黄体酮。本发明具有如下优点：(1)投料浓度高，底物摩尔转化率高。投料浓度可达到30g/L，最高摩尔转化率可达到91.9%。(2)磁性纳米四氧化三铁粉可回收循环利用。本发明所采用磁性纳米四氧化三铁粉，可大幅度提高羟基转化率，工艺简单，生产成本低，具有较高的工业应用前景。