本发明公开一种可注射水凝胶及其制备方法，制备方法包括以下步骤：将生物组织依次进行细胞破碎、第一次蛋白酶解、清洗、脱脂处理和脱细胞处理，得脱细胞基质，将脱细胞基质冻干以备用；将冻干的脱细胞基质进行第二次蛋白酶解，得6‑40mg/mL可溶于水的细胞外基质蛋白溶液；将细胞外基质蛋白溶液与10‑100mg/ml含有琥珀酰亚胺基团、和/或巯基基团、和/或马来酰亚胺基团、和/或氨基基团的多臂修饰性聚乙二醇进行交联，得可注射水凝胶。可注射水凝胶由上述方法制成。本发明提供的制备方法简单，所制备的水凝胶不仅具有胶原蛋白的生物诱导性，而且具有高分子材料降解速率可控的性质。